Діафільтрація для швидкого буферного обміну

Обмін буферу — це проста, але важлива техніка, яка широко використовується в більшості процесів очищення макромолекул. Вона дозволяє видалити небажані речовини, скоригувати умови зразка або додати до нього необхідні компоненти.

Наприклад, ефективне захоплення макромолекули під час іонообмінної або афінної хроматографії відбувається за певних буферних умов. 

Тому зазвичай рекомендується попередньо перевести зразок у оптимальний буфер для завантаження перед проведенням хроматографії.

Типові області застосування буферного обміну

• Видалення солей і детергентів

• Регулювання іонної сили та pH

• Видалення низькомолекулярних забруднювачів

• Введення кофакторів або інгібіторів

• Додавання консервантів

Існує три основні методи буферного обміну: діаліз, гель-фільтрація та ультрафільтрація (див. Таблицю 1).
Рішення для буферного обміну від Sartorius використовують ультрафільтрацію як пріоритетний метод завдяки її гнучкості, високій швидкості та меншому споживанню буфера порівняно з іншими методами.

Процес діафільтрації передбачає утримання макромолекул всередині фільтраційного пристрою, у той час як буфер і низькомолекулярні компоненти проходять через напівпроникну мембрану. Таким чином, буферний обмін відбувається шляхом поступового розведення та концентрації ретентату.

Як і у випадку з гель-фільтрацією, існує кілька типів ультрафільтраційних пристроїв, які дають змогу проводити швидку діафільтрацію за допомогою:

• центрифугування,

• газового тиску,

• поглинання розчинника,

• тангенціального потоку (TFF).

Необхідне обладнання для цих методів зазвичай наявне в більшості дослідницьких лабораторій (наприклад, центрифуга, джерело стисненого газу або перистальтичний насос), а діапазон робочих об’ємів — від 0,1 до 500 мл і більше — дозволяє охопити найширший спектр застосувань.

Переваги діафільтрації:

• Висока швидкість – Економія понад 90% часу порівняно з традиційними методами

• Максимальна ємність – Буферний обмін в один етап для об’ємів зразків до 500 мл

• Простота використання – Легкі у застосуванні рішення з мінімальними вимогами до обладнання

• Менше відходів – Завдяки низькому об’єму обміну буфера споживання знижується більш ніж на 98%

Чашки для діафільтрації Vivaspin 20, 12 шт. у упаковці

Ультрафільтраційний блок з унікальною подвійною мембраною для концентрування зразка з високою технологічною гнучкістю: центрифугування або центрифугування під тиском, а також фільтрація під тиском у стаціонарному настільному модулі. 20 мл – 50 мкл

• Мембрана з високими показниками гідравлічної проникності з ПЕС

• Високий ступінь відновлення концентрату — понад 90%

• Вертикальні подвійні мембрани для надзвичайно швидкого збільшення концентрації

• Універсальна сумісність із ротором

• Безпечне концентрування зразка завдяки режиму повної зупинки

• Зручне відновлення концентрату за допомогою піпетування

• Об’ємна градуйованість для легкого зчитування показань і контролю

• 100-кратне концентрування завдяки подвійним вертикальним мембранам

• Додаткова опція для роботи під тиском

Резервуар для проб/діафільтрації об’ємом 500 мл 

Резервуар для зразків і діафільтрації, призначений для використання з системами Vivaflow®. 

Забезпечує зручне внесення зразків і безперервну заміну буфера.